斑馬魚(yú)藥物篩選和評價(jià)

項目介紹：

斑馬魚(yú)模型由于特殊的生理優(yōu)勢被逐漸應用于藥物篩選和安全性評價(jià)，與哺乳動(dòng)物相比，斑馬魚(yú)實(shí)驗成本相對較低，試驗周期短（48小時(shí)），樣品用量少（微克級）、結果觀(guān)察容易（幼魚(yú)通體透明）、體外發(fā)育，繁殖力強，適合于大規模的篩選。同時(shí)藥物暴露（異種生物、激素、藥物以及環(huán)境污染物）能夠引起斑馬魚(yú)出現與哺乳動(dòng)物類(lèi)似的生理反應和病理響應。

斑馬魚(yú)藥物篩選和評價(jià)的應用方向主要有：

?   篩選和確認毒性部位及成分

?   確定藥物的毒性靶器官及其毒性機制

?   闡釋毒性-代謝關(guān)系

?   潛在藥物的毒性篩選和評價(jià)

服務(wù)內容

?   藥物高通量體內篩選

?   一站式藥效學(xué)快速評價(jià)

?   藥物毒性與安全性評價(jià)

案例分析

應用案例

?   快速分析藥物的胚胎毒性，心臟等靶器官毒性分析

?   胚胎死亡率-濃度曲線(xiàn)及形態(tài)學(xué)觀(guān)察

?   斑馬魚(yú)心臟毒性觀(guān)察

常見(jiàn)問(wèn)題

1. 斑馬魚(yú)對常見(jiàn)有機溶劑的耐受性

研究表明，斑馬魚(yú)胚胎和仔魚(yú)對DMSO、DMF、乙醇、丙酮等的耐受性為0.5-2.5%(孵育時(shí)間為24小時(shí))。以DMSO為例。一般在細胞實(shí)驗中不超過(guò)0.1%，而斑馬魚(yú)胚胎和仔魚(yú)通常暴露在高達1%的DMSO中。在斑馬魚(yú)毒性實(shí)驗中，胚胎對2.5% DMSO有很好的耐受性。友情提醒，在大多數胚胎孵化中，最終DMSO濃度仍控制在0.1%以下。

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2. 怎么確定半數致死濃度LC50

LC50是指在動(dòng)物急性毒性實(shí)驗中，使受試動(dòng)物半數死亡的毒性濃度。

將供試品設置一系列濃度，并設置一個(gè)正常對照組，每組設置3個(gè)生物學(xué)重復。藥物通過(guò)溶解到養魚(yú)用水中或灌胃的方式讓斑馬魚(yú)攝入，進(jìn)行一定時(shí)間的暴露實(shí)驗。

每天觀(guān)察記錄斑馬魚(yú)死亡情況，藥物處理結束后，統計各實(shí)驗組的斑馬魚(yú)致死率，使用統計學(xué)軟件繪制最佳的劑量效應曲線(xiàn)，并計算LC50。

3. 怎么用斑馬魚(yú)評價(jià)藥物的發(fā)育毒性與致畸性風(fēng)險

將受測試斑馬魚(yú)胚胎進(jìn)行分組，其中正常對照組未攝入待測藥物或者僅攝入藥物溶劑，藥物組根據LC50濃度攝入了不同濃度（通常設置3個(gè)濃度梯度）的待測藥物。

在藥物暴露過(guò)程中，每天觀(guān)察記錄各個(gè)濃度組斑馬魚(yú)的死亡情況，并及時(shí)挑走死魚(yú)。統計斑馬魚(yú)死亡情況并使用軟件擬合數據曲線(xiàn)，獲得藥物的最大非致死濃度（MNLC）和LC10。藥物暴露結束后，觀(guān)察記錄斑馬魚(yú)身體各個(gè)指標的情況并對典型毒性器官進(jìn)行顯微拍照。