細胞基因編輯服務(wù)

項目介紹

 

基因編輯是指通過(guò)特異性改變目標基因序列以獲得期待的生物性狀的手段。百維斯生物依托先進(jìn)的技術(shù)和專(zhuān)業(yè)的科研團隊，根據客戶(hù)需求和要求幫助客戶(hù)構建相關(guān)載體、檢測編輯效率及篩選基因編輯單克隆。在整個(gè)項目過(guò)程中，百維斯生物專(zhuān)業(yè)的項目管理專(zhuān)員，將密切跟蹤項目，并階段性的給客戶(hù)提供更新、咨詢(xún)以及售后服務(wù)。

 

 

服務(wù)內容

 

服務(wù)項目

服務(wù)內容

CRISPR/Cas9 敲除細胞系構建

CRISPR/Cas9 系統利用 sgRNA/Cas9 復合體識別并在 DNA 特異位點(diǎn)造成雙鏈斷裂，利用細胞自身修復機制或者與外源 DNA 同源重組實(shí)現基因敲除。

過(guò)表達穩轉細胞系構建

將目的基因定點(diǎn)整合到基因組的經(jīng)過(guò)篩選的高表達活性位點(diǎn)中，這些位點(diǎn)不僅安全而且基因表達量高，可以實(shí)現目的基因過(guò)表達，并能長(cháng)期穩定遺傳。實(shí)驗周期短（3-6 周），整合效率高。對于不同長(cháng)度的基因的整合，能達到一致整合效率，并可同時(shí)整合多個(gè)基因。

CRISPR/CasRx 敲降細胞系構建

是指通過(guò)降解具有同源序列靶基因的mRNA，達到阻止基因表達的作用。百維斯生物創(chuàng )新的CRISPR/CasRx knockdown 技術(shù)，能夠識別所有的目標RNA，不需要特異的序列元件，具有操作容易、可以同時(shí)靶向多個(gè)靶點(diǎn)的優(yōu)勢，可以實(shí)現目的基因的敲降研究。

IOS 誘導表達細胞系構建

Tet-Off/Tet-On 系統是比較成熟的真核生物外源基因誘導表達系統之一,具有高效、無(wú)毒、開(kāi)/關(guān)較嚴密等特點(diǎn)，已被成功地應用于細胞和轉基因小鼠基因誘導表達的研究。

 

 

技術(shù)流程

 




 

 

案例展示

 

CLCA2過(guò)表達的抑制子宮頸癌細胞的遷移

 
















 

 





常見(jiàn)問(wèn)題

 

1.    如何進(jìn)行細胞RNA 提??？

?   Trizol 是一種單相溶液，由苯酚和異硫氰酸胍等組成。通過(guò)加入Trizol，能破壞細胞和溶解細胞成分，利用氯仿的萃取得到上層水相（含RNA）、界面層和下層的紅色有機相（含DNA和蛋白）。得到的水層用異丙醇沉淀并經(jīng)過(guò)酒精的洗滌去除雜質(zhì)，能分離大小不一的各種RNA。

?   用途：RT-PCR、分子克隆、Northern-Blot、RNA體外轉錄與翻譯等。

 

2.    什么是細胞轉染？

?   細胞轉染是指將外源分子如 DNA、RNA、蛋白質(zhì)等導入到真核細胞的技術(shù)。隨著(zhù)基因和蛋白功能的深入研究，轉染已經(jīng)成為科研實(shí)驗中最常用的技術(shù)手段之一。目前常用的轉染方法有陽(yáng)離子聚合物轉染、脂質(zhì)體轉染、電穿孔和病毒感染，不同的轉染方法各有利弊，沒(méi)有一種轉染試劑是普遍適用的，我們需要依據自己的實(shí)驗需求選擇合適的轉染技術(shù)及轉染試劑，才有可能得到理想的實(shí)驗結果。

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